新冠核酸檢測PCR實驗室建設依據
發布時間：2022-08-22 09:20:12
RT-PCR是檢測新型冠狀病毒核酸最廣泛、最準確的篩選和確認方法。大規模的核酸檢測將不可避免地引起相關機構和單位重視建立標準化的臨床PCR實驗室。
01新冠核酸檢測PCR實驗室建設依據
新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版）、GB19489-2008《實驗室生物安全通用要求》、GB50346-2011《生物安全實驗室建筑技術規范》、WS233-2017《病原微生物實驗室生物安全通用準則》、《臨床基因擴增實驗室管理暫行辦法》衛生部、《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》衛辦醫政發【2010】194號、《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》。
02初步了解PCR實驗室
實驗室內會為核酸檢測準備4個區域，分別是試劑準備區、樣本準備區、擴增區、擴增產物分析區。
其中試劑準備區負責接收患者樣本，樣本準備區則負責進行對樣本的核酸進行提取，擴增區則是擴增復制核酸樣本，擴增后分析區就是分析樣本內核酸能能否與標準樣配對，通過儀器檢測的到，就判斷成陽性，如果檢測不到就是陰性。
PCR實驗室分類：普通PCR實驗室、全自動定量PCR實驗室、一體自動化分析PCR實驗室。
PCR實驗室功能區域：
試劑準備區：是PCR實驗室中最為“潔凈”的區域，它不應有任何核酸成分的存在，否則將嚴重影響檢測結果的準確性。標本的制備應在生物安全柜內進行。
主要設備：冰箱、低溫冰箱、混勻器、微量加樣器（0.2-1000ul）、移動紫外燈。
樣本準備區：核酸提取、貯存，擴增反應管制作。
主要設備：冰箱、超低溫冰箱、高速冷凍離心機、混勻器、微量加樣器（0.2-1000ul）、移動紫外燈、水浴鍋、生物安全柜。
擴增區：擴增反應體系的配置和核酸的提取加入要在擴增區內進行。
主要設備：擴增儀、離心機、微量加樣器（0.2-1000ul）、移動紫外燈。
擴增產物分析區：產物分析區最后一個工作區域，用于擴增片段的分析。
主要設備：凝膠成像分析儀、電泳儀、電泳槽、微量加樣器（0.2-1000ul）、移動紫外燈。
PCR實驗室工作流向
進入各工作區域必須嚴格按照單一方向進行。即試劑準備區→樣本準備區→擴增區→擴增產物分析區。
03新冠核酸檢測實驗室設計參數（供參考）
一般情況下，PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求，因此有必要根據實驗內容來確定實驗室的潔凈度。當PCR實驗樣品需要保護時，實驗室應設潔凈空調系統。對于新冠核酸檢測實驗室，建議設置10萬級凈化。
04新冠核酸檢測實驗室建設的幾個關鍵點
1.平面布局：不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室，各功能房間均宜設置獨立緩沖間。
1）試劑準備區是工藝流線的開始，設計為正壓或常壓，避免外界環境的污染。
2）樣品制備區一般為常壓或負壓，大多數情況下設計成二級生物安全實驗室，避免實驗產物溢出，污染外界環境。
3）核酸擴增區為負壓，避免實驗產物溢出，污染外界環境。
4）產物分析區是最主要的擴增產物污染來源，通常壓力設計為最低，避免實驗產物溢出，污染外界環境。
2.區域空氣流向：為避免交叉污染，PCR實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。
3.通風空調：為避免交叉污染，各功能用房內空氣不能摻混�；旌鲜絇CR實驗室應采用新風直流空調系統，當采用新風系統有困難時，各區域的空氣只能在自己的房間內循環。
4.生物安全：按照新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版）的規定，2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進行管理，則樣本植被區宜為負壓或加強型P2實驗室，核酸操作應在生物安全柜內進行。
5.關鍵技術措施包括：
*絕對負壓（避免室內潛在污染外泄）
*氣流組織（室內定向流，從低污染風險區流向高污染風險區）
*排風無害化處理（高效過濾、高空排放）
05新冠核酸檢測實驗室氣流組織建議
（1）氣流組織宜采用上送下排，送風口和排風口布置應使室內氣流停滯的空間降低到最小程度。
（2）在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設送風口。
（3）高效過濾器排風口應設在室內被污染風險最高的區域，單向布置，不得有障礙。
（4）不能以回（排）風夾墻代替排風直管，排風高效過濾裝置與排風總管的連接必須全部是實體風管。
06新冠核酸檢測實驗室裝飾裝修
核酸檢測實驗室有設計理念、裝修要求、凈化空調系統、通風、自控、工藝設備等幾個關鍵點。
材質：隔墻及吊頂——凈化彩鋼板、地面——同質透芯PVC地板、凈化實驗室專用門、觀察窗；
要求：
1.墻面：光潔、不產塵積塵、耐腐蝕，易清潔消毒、無縫隙；
2.地面：防靜電、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏；
3.陰陽角：均用圓弧角密封處理；
4.門：必須設置自動互鎖(機械或電子)；
凈化空調、通風系統、自控系統
1.避免交叉污染，采用全新風空調系統；
2.樣品制備區嚴格按照BSL-2設計施工；
3.排風系統全部按照要求采用高效過濾器凈化；
4.氣流組織：采用上送下排形式；
5.壓力梯度控制通過微壓差計及精密自控系統控制；
6.實驗室入口處顯示房間內各項指標參數，并設置偏離報警；
07工藝設備
1.實驗臺下部均留空，無死角；
2.全部采用不銹鋼304制作；
3.樣品制備區生物安全柜；
4.樣品制備區設置洗眼裝置，必要時應有應急噴淋裝置；
5.非接觸式操作理念(感應式水龍頭、感應式自動門、互鎖傳遞窗等)；
實驗室建設涉及到材料選擇、穩定性、精度控制等多個技術和知識領域。不同的實驗室由于試驗樣品和試驗方法的不同，對實驗室建設有不同的要求�？梢哉f有很多不同之處。一個完善的實驗室在分析檢測中起著重要的作用，對保證實驗室工作人員的健康也起著重要的作用。
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